紅細(xì)胞裂解液的取用規(guī)則和注意事項(xiàng)

更新時(shí)間：2022-06-13 | 點(diǎn)擊率：3657

　　紅細(xì)胞裂解液主要包括植物、動(dòng)物、微生物基因組DNA的提取與鑒定，哺乳動(dòng)物組織總RNA的提取與鑒定，質(zhì)粒DNA的提取與鑒定，PCR擴(kuò)增，分子雜交技術(shù)，限制性內(nèi)切酶消化，分子克隆全過程和基因文庫的構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的原理及步驟。經(jīng)過過濾滅菌處理，主要用于流式細(xì)胞分析時(shí)，裂解液和組織中的紅細(xì)胞。也可以用于核酸純化時(shí)裂解紅細(xì)胞。

　　紅細(xì)胞裂解液的取用規(guī)則：

　?。?）試劑不能與手接觸。

　　（2）要用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，不準(zhǔn)用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后，應(yīng)將工具洗凈（藥勺要擦干）后，方可取用另一種試劑。

　?。?）試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后將瓶放回原處

　　（4）已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。

　　紅細(xì)胞裂解液的注意事項(xiàng)：

　　1、制備細(xì)胞懸液時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，不一定要制備成單細(xì)胞懸液。

　　2、后續(xù)試驗(yàn)如果是用于細(xì)胞培養(yǎng)，操作過程中應(yīng)注意無菌操作，盡量在超凈工作臺內(nèi)操作。

　　3、離心步驟盡量在4℃離心機(jī)上操作。

　　4、常規(guī)步驟與快速步驟的區(qū)別在于：常規(guī)步驟多了一步洗滌過程的離心，可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好，不需要大體積的離心管；快速步驟少了一次離心過程，洗滌效果略差一些，同時(shí)需要大體積的離心管。

　　5、離心洗滌后，通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的檢測。

　　6、如果經(jīng)過處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提取，在處理細(xì)胞時(shí)不必使用DEPC處理的溶液，即無需在該操作中特意去除RNase。